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發(fā)布于 2012/11/08閱讀(1297)來(lái)源 zxj標(biāo)簽 光散射技術(shù)
摘要
內(nèi)容
動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)的應(yīng)用
溶液中的顆粒物質(zhì)(如生物大分子、高分子聚合物、膠束等),其顆粒大小的變化往往可以反應(yīng)出某些性質(zhì)方面的變化。由于光散射實(shí)際上是首先
通過(guò)測(cè)量大分子物質(zhì)的擴(kuò)散系數(shù),進(jìn)而推導(dǎo)出其它參數(shù)。所以,光散射不僅可以用來(lái)進(jìn)行靜態(tài)測(cè)量,還可以檢測(cè)一些動(dòng)態(tài)過(guò)程的變化。
下面以大家熟悉的生物學(xué)中的幾個(gè)具體實(shí)例來(lái)介紹動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)的應(yīng)用。
1.測(cè)定蛋白質(zhì)分子的均一性
蛋白質(zhì)樣品的均一性是生長(zhǎng)晶體的前提條件,在無(wú)法直接觀察蛋白質(zhì)在溶液中狀態(tài)的情況下,生長(zhǎng)晶體是一個(gè)需要經(jīng)驗(yàn)和運(yùn)氣的過(guò)程。但是用光散射技術(shù),只需要幾分鐘就可以確切地告訴你,這個(gè)樣品是否有長(zhǎng)出晶體的可能性。你還可以測(cè)定蛋白在不同溶液中的狀態(tài),從而確定出哪種溶液最適合生長(zhǎng)晶體。
2.測(cè)定蛋白質(zhì)分子的pH穩(wěn)定性
有些蛋白質(zhì)分子在不同的pH值條件下,會(huì)有不同的構(gòu)型,或者形成聚合態(tài),或是變性。如胰島素在pH2.0時(shí)是以單體存在,而在pH3.0時(shí)則以二聚體形式存在,當(dāng)pH升至7.0時(shí)則以六聚體存在。因?yàn)檫@種變化表現(xiàn)為大小的變化,所以光散射技術(shù)可以用來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)分子的pH穩(wěn)定性。
3.測(cè)定蛋白質(zhì)分子的熱穩(wěn)定性
對(duì)一些熱不穩(wěn)定的蛋白,溫度改變會(huì)導(dǎo)致分子變性聚合,因此可以觀察到分子半徑明顯增大。所以可以利用光散射技術(shù)來(lái)研究蛋白質(zhì)分子的熱穩(wěn)定性。
4.蛋白質(zhì)變復(fù)性及折疊的研究
蛋白質(zhì)變性時(shí)往往是以聚合形式或較松散的狀態(tài)存在,復(fù)性后,蛋白質(zhì)折疊成天然狀態(tài),會(huì)發(fā)生結(jié)構(gòu)的變化,這一變化可以導(dǎo)致流體動(dòng)力學(xué)半徑的變化,所以光散射技術(shù)可以用來(lái)檢測(cè)這一動(dòng)態(tài)變化的過(guò)程。
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